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CCK8检测细胞增殖/毒性的原理

一、CCK8检测细胞增殖/毒性的原理

CCK8检测细胞增殖/毒性的原理

Cell Counting Kit-8(简称cck-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。

用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验

CCK8的优点
  • 使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂;
  • CCK-8法能快速检测;
  • CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度;
  • CCK-8法的重复性优于MTT 法;
  • CCK-8法对细胞毒性小;
  • CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。

CCK8的缺点
  • 与MTT法相 比,CCK8和XTT的价格比较贵。
  • CCK8试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,不注意的话容易产生漏加或多加。

与以往的增殖/毒性测定试剂相比较

检测方法
MTT法
XTT法
WST-1法
CCK8法
甲臢产物的水溶性
差(需加有机溶剂溶解)
产品性状
粉末
2瓶溶液
溶液
1瓶溶液
使用方法
配成溶液后使用
现配现用
即开即用
即开即用
检测灵敏度
很高
很高
检测时间
较长
较短
较短
最短
检测波长
560-600nm
420-480nm
420-480nm
430-490nm
细胞毒性
高,细胞形态完全消失
很低,细胞形态不变
很低,细胞形态不变
很低,细胞形态不变
试剂稳定性
一般
较差
一般
很好
批量样品检测
可以
非常适合
非常适合
非常适合
便捷程度
一般
便捷
便捷
非常便捷

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