一、CCK8检测细胞增殖/毒性的原理
Cell Counting Kit-8(简称cck-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。
用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验
CCK8的优点:
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使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂;
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CCK-8法能快速检测;
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CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度;
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CCK-8法的重复性优于MTT 法;
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CCK-8法对细胞毒性小;
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CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。
CCK8的缺点:
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与MTT法相 比,CCK8和XTT的价格比较贵。
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CCK8试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,不注意的话容易产生漏加或多加。
与以往的增殖/毒性测定试剂相比较:
检测方法
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MTT法
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XTT法
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WST-1法
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CCK8法
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甲臢产物的水溶性
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差(需加有机溶剂溶解)
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好
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好
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好
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产品性状
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粉末
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2瓶溶液
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溶液
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1瓶溶液
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使用方法
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配成溶液后使用
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现配现用
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即开即用
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即开即用
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检测灵敏度
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高
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很高
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很高
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高
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检测时间
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较长
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较短
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较短
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最短
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检测波长
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560-600nm
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420-480nm
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420-480nm
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430-490nm
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细胞毒性
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高,细胞形态完全消失
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很低,细胞形态不变
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很低,细胞形态不变
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很低,细胞形态不变
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试剂稳定性
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一般
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较差
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一般
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很好
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批量样品检测
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可以
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非常适合
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非常适合
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非常适合
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便捷程度
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一般
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便捷
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便捷
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非常便捷
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