具体步骤:
8. 4℃,14000g 离心15min,将上清转移到一个新的离心管中。
9. 测定蛋白浓度,可选用Bradford法做蛋白标准曲线。
10. 蛋白定量,分装,-20℃保存,可保存1个月。
11. 用PBS液将总蛋白稀释至约1ug/ml。
12. 加入500ul稀释好的兔抗到总蛋白中。
13. 于摇床上4℃缓慢摇动抗原抗体混合物,可选择过夜或室温放置2h。
14. 加入100ul Protein A琼脂糖珠用以捕捉抗原抗体复合物,摇床4℃缓慢摇动抗原抗体混合物过夜或者室温孵育1h。