细胞杂交技术
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发布时间：2016-09-19
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动物细胞融合也称细胞杂交 (cell hybridization)，是指两个或多个动物细胞融合成一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞(hybrid cell)基因型相同的细胞融合成的杂交细胞称为同核体(homokaryon);来自不同基因型的杂交细胞则称为异核体(heterokaryon)。
细胞 融合的具体步骤包括：
(1)细胞准备。分贴壁和悬浮细胞两种。前者可直接将两亲本细胞混合培养 ，后者需制成一定浓度的细胞悬浮液。
(2)细胞融合，加促融因子于将行融合的细胞之中，诱导融合。
(3)杂种细胞选择。利用选择性培养基等，使亲本细胞死亡，而让杂种细胞存活。
(4)杂种细胞克隆。对选出的杂种细胞进行克隆(选择与纯化)，经过培养，就能获得所需要的无性繁殖系。
细胞杂交
同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并，称自发融合;异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合，称诱发融合。
诱导细胞融合的方法有三种：生物方法(病毒)、化学方法(聚乙二醇PEG)、物理方法(电激和激光)。某些病毒如：仙台病毒、副流感病毒和新城鸡瘟病毒的被膜中有融合蛋白(fusion protein)，可介导病毒同宿主细胞融合，也可介导细胞与细胞的融合，因此可以用紫外线灭活的此类病毒诱导细胞融合。化学和物理方法可造成膜脂分子排列的改变，去掉作用因素之后，质膜恢复原有的有序结构，在恢复过程中便可诱导相接触的细胞发生融合。
细胞融合不仅可用于基础研究，而且还有重要的应用价值，在植物育种方面已经成功的有萝卜+甘蓝、粉蓝烟草+郎氏烟草、番茄+马铃薯等等。
单克隆抗体技术是细胞杂交技术的成功应用(图2-27)，正常淋巴细胞(如小鼠脾细胞)具有分泌抗体的能力，但不能在体外长期培养，瘤细胞(如骨髓瘤)可以在体外长期培养，但不分泌抗体。于是英国人Kohler和Milstein 1975将两种细胞杂交而创立了单克隆抗体技术，获1984年诺贝尔奖。
