实验试剂
60%酒精、70%酒精、80%酒 精、90% 酒精 、95%酒 精、
100%酒精、盐酸酒精、二甲苯、石蜡、蒸馏水、苏木素、法兰 、依红、生理盐水、3%戊巴比妥钠、4%甲醛
实验方法
环境条件为干球温度(Tdb)26.88 ℃±0.38 ℃、湿球 温度(Twb)23.62 ℃ ±0.52 ℃、相 对湿度(Rh)72.00%±2.35%。 Wistar 大鼠称重后以 3%戊巴比妥钠(30 mg/ kg)腹腔注射麻醉。根据不同体质量占实验动物腹部备皮, 备皮后固定于大鼠实验台上切取对照组全层皮肤, 大小 1 cm ×1cm, 用 4%甲醛溶液固定。两组大鼠分别采取不同的烫伤条件。 根据文献, 第 1 组烫伤条件为 99℃, 持续 3 s;第 2 组烫伤条件为 99 ℃,持续 10 s。 烫伤时, 将大鼠移近加热自来水的烧杯, 将纱布浸入热水中, 待水温恒定于 99 ℃时, 取出纱布, 立即平铺于待烫部位, 长直钳方向与大鼠身体长轴平行, 以纱布接触大鼠皮肤后计时, 时间一到立即将纱布移去。 切取烫伤部位全层皮肤 1 cm×1 cm, 用 4%甲醛溶液固定。 大鼠烫伤、取皮后压迫止血, 分别放置, 同等条件下饲养, 观察伤口愈合情况。 皮肤组织经过梯度乙醇系列脱水、透明、60 ℃浸石蜡包埋后切片 4 μm, 采用 70 ℃烤箱烤片 1 h, 常规 HE 染色, 中性塑胶封片后光镜下观察。
浅Ⅱ度烧伤大鼠皮肤(40倍)
冷却疗法, 简称冷疗, 是把烧伤部位置于相对低的温度环境中, 使烧伤局部因冷而得到一定的治疗作用。 适用范围为中 、小面积(烧伤总面积, TBSA <20%)Ⅱ度烧伤。 由于监测生理指标时大鼠右股动脉插管, 需采取仰卧位, 故选取腹部作为烫伤部位。 且腹部较平坦, 易于制作烫伤模型。 腹部可提供的适宜烫伤范围为 10%的 TBSA , 在冷疗适用范围内, 所以两组动物烫伤模型的制作均符合实验要求。 大鼠右股动脉插管后不能再移动, 因此, 某些文献报道的烫伤模型制作方法不适用。 文献报道的烫伤模型制作方法采用的烫伤温度与持续时间各不相同。 考虑到本实验是大鼠施行右股动脉插管术后再制作烫伤模型, 为了尽早开始后续实验, 也为了减少纱布从热水中取出后温度下降的系统误差, 拟筛选出温度更高、持续时间更短的烫伤条件。
烧伤大鼠皮肤(40倍)
创面烫伤程度除了与温度和持续时间相关 , 还受压力因素的影响。 研究指出, 目前多采用的加热铁板、铜板、烫伤器等方法, 由于压力不易掌握, 所以造成创面烫伤深浅不一 。 这是由于此类烫伤用物的致伤部位为一坚硬的平面, 与大鼠弧形的腹部皮肤表面不相吻合, 只能通过施加压力, 使腹部皮肤形成一平面, 在烫伤过程中势必使皮肤弧面顶点先受热力损伤, 最后是弧面的最低点, 弧面顶点所受压力最大。 这种热力致伤过程的不平衡性导致创面烫伤程度深浅不一。 本研究选用纱布作为致伤用物, 原因之一是纱布柔软, 容易变形;二是纱布中浸满热水, 可利用热水的重力作用使其与皮肤弧面紧贴, 而无需再施以压力。此外, 长直钳起到绷紧纱布的作用, 使其在致伤过程中不会起皱。
(本文转载生物通)