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小鼠肠系膜微循环实验实验指导

 

小鼠肠系膜微循环实验

 

【目的】
     

      1.学习动物微循环显微观察方法。
      2.观察药物对小鼠肠系膜微循环障碍的影响。

 

【原理】

 

      借助微循环显微观察系统,直接观察微血管特别是毛细血管的数量和形态,血液特别是血细胞在血管内的流动状态,以及毛血管周围状态,了解用药前后肠系膜微循环的变化。


 

【器材】

 

      显微镜或显微录像系统、冷光源、小鼠肠系膜观察台、恒温 水浴 、手术器材、注射器等。


 

【药品】


      复方扶芳藤合剂(原液)不含糖醇提物、0.004%去甲肾上腺素(NA)、0.4%戊巴比妥钠溶液


 

【动物】

 

      小白鼠


 

【方法】 
  

      1.选取禁食12h以上小鼠10只,体重20~22g,雌雄各半。
      2.麻醉:0.4%戊巴比妥钠溶液0.2ml/10g体重,ip。
      3.手术:腹部切开一小口→轻轻拉出一段回肠→平铺于特制的有机玻璃灌流小池上,内盛有37±1℃任台氏液,以保持活体标本的恒温、恒湿、恒pH和一定的离子浓度。
      4.用显微镜放大100倍,选择肠系膜微血管(选用毛细血管与1mm横线相交点)进行观察。
      (1) 在视野下局部滴注NA 0.1ml造成微循环障碍。
      (2) 在视野下局部滴注受试药物0.1ml(对照组给予同体积的NS),观察药后血流速度的变化。

 

【结果

 

      观察微血管开放时间( min)的变化,结果填入表4。本实验对正常动物微循环血液流速无明显影响。

 


【注意 】 

 

      1、温度对肠系膜微循环影响较大,应保持活体肠系膜标本在37±1℃。

      2、腹部切口以1.5~2cm为宜,切口过大肠管易涌出影响观察,切口过小寻找观察部位不便且影响循环。

      3、本实验是观察对正常小鼠微循环的影响,可预先复制微循环障碍动物模型(Animal Models),观察活血化瘀方药对微循环障碍的影响。

 

   (本文转载丁香园)

 

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