目的:评估登革热病毒的实时荧光定量RT-PCR方法,该方法用于检测登革热小鼠模型的关键指标。
方法:首先,选择合适的特异性引物和探针,通过分子生物学方法制备质粒标准品,并优化PCR系统和反应条件。接下来,我们将评估实时荧光定量RT-PCR方法的敏感性,特异性和稳定性。验证了该方法对登革病毒感染小鼠血清和组织样品的适用性。该结果证实了一步一步实时荧光定量RT-PCR方法。此方法更灵敏,最小检测线为49.6拷贝/μL。该方法是高度特异性的,并且没有非特异性扩增。稳定性和样品Ct值都很好。所有标准偏差均小于0.5、CV小于5%。登革热病毒感染的小鼠模型样品的测试结果符合实验的预期。
结论:QRT-PCR方法可作为登革热小鼠模型病毒定量检测和评估的重要指标检测方法。