目的:检测雄性和雌性小鼠肝脏组织中蛋白质组表达的差异,并探讨肝脏疾病中性别差异的机制。
方法:2D差异凝胶电泳(2D差异凝胶电泳,2D-DIGE)和基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(矩阵辅助激光解吸/电离时间离场质谱),MALDI -TOF-MS)。 C57BL/6J男女小鼠肝组织蛋白质组差异表达谱,差异表达蛋白质的分离与鉴定,蛋白质印迹法在验证中的应用以及蛋白质功能注释,分类学分析等。生物信息学分析,Kyoto基因和基因组百科全书的途径分析。
结果:二维荧光差异凝胶电泳-图像分析后,获得了1767个蛋白斑点,其中325个蛋白斑点相差超过1.5(Pu003c0.05)。选择了78个不同的蛋白质斑点进行MALDI-TOF-MS鉴定,得到48个不同的表达蛋白质。其中,与雌性小鼠相比,雄性小鼠肝组织中有14种高表达蛋白和34种表达不足的蛋白。选择了六个不同的蛋白质斑点进行Western blot验证,证明了2D-DIGE结果的可靠性。 GO分析的结果表明,雄性和雌性小鼠肝脏组织中涉及的不同蛋白质广泛分布于细胞组成,分子功能和生物学过程中。 KEGG通路分析表明,差异蛋白涉及六个信号通路。
结论:C57BL/6J雄性和雌性小鼠肝组织蛋白质表达差异的检测结果提供了基础生物学信息,为研究性别特异性肝病的分子机制提供了有用的线索。