背景：流行病学和临床研究表明，原发性头痛，尤其是偏头痛，与抑郁症和焦虑症双向相关。抑郁症患者发生偏头痛的可能性是非抑郁症患者的三倍以上。与偏头痛患者相比，偏头痛患者的抑郁风险比对照组高三倍以上。许多患有抑郁症和焦虑症的人患有慢性头痛，而不是暂时性头痛。抑郁症和焦虑症的并存会增加偏头痛患者头痛的频率。我们先前曾报道过沮丧的动物（使用嗅球切除术或不可预测的慢性轻度应激模型）会导致严重的不良行为并增加血浆P物质的水平。但是，尚不清楚慢性偏头痛是否会引起情绪障碍。已经提出了几种慢性偏头痛的动物模型。向硬脑膜注入重复性炎性汤是最广泛使用的脑膜伤害感受模型之一、因为它模仿了偏头痛病理生理学的神经系统炎症。最近，停滞已被用作慢性偏头痛和药物滥用性头痛患者心理测量特征的量度。使用汉密尔顿焦虑量表和焦虑自我评估量表来评估焦虑程度。评估动物的情绪障碍非常困难。愉悦是抑郁症的主要症状，通常使用蔗糖适口性测试进行测试。采矿测试已用于测试新环境中的探索行为和张力以及测试抑郁和焦虑。行驶的距离代表体育活动。动物后肢的等级数代表举起行为。此行为类似于汉密尔顿心理运动延迟评分量表（运动活动减少）。体重变化抑郁症的临床特征。如果受试者在3天内减掉2公斤，他们将在汉密尔顿抑郁量表上获得2分。因此，权重是另一个指标参数。研究人员使用这些测试来评估在动物模型（如不可预测的慢性轻度应激模型）中建立抑郁症的成功性。在其他动物模型中也发现了类似抑郁症的行为，但是这种行为很温和且难以发现。需要一个动物秤来整合所有指标，以评估抑郁和焦虑的程度。慢性偏头痛的大鼠模型用于评估大鼠的抑郁和焦虑行为，并确定这些情绪障碍的量度。

　　方法：将雄性Wistar大鼠（体重180-200克）置于22-25°C的繁殖环境中。

　　动物分组：将大鼠分为4组：对照组（n ＝ 10，CON），IS（n ＝ 10； 1只因插管而死的大鼠），IS +阿米替林（AMI）（从n ＝ 10恢复后），进行AMI（n = 10）插管，记录面部回避阈值，并进行蔗糖偏爱和高迷宫度（EPM）测试，以获得基线测量值。对于IS和IS + AMI组，大鼠接受2ul的IS。 AMI组和CON组接受相同量的生理盐水，并使用微注射器插管21天。将AMI溶于水，给予IS + AMI和AMI组（5 mg/kg灌胃），并且IS和CON组接受相同剂量的生理盐水，持续21天。在21天的实验中，每天测试疼痛阈值，每周测量和测试体重和蔗糖偏爱。 21天后进行了OF和EPM测试。

　　手术：大鼠在手术前禁食。将大鼠用10％水合氯醛（4 mL/kg，腹膜内注射[IP]）麻醉，并置于立体定向固定架中。在头部水平切开，并用3％的过氧化氢去除所有结缔组织，以暴露前the。使用直径为1 mm的钻头进行开颅手术，以避免损坏硬脑膜。将塑料套（不锈钢针）插入距底部1毫米的位置，插入孔中并用502胶固定。使用配套的盖子关闭套筒，以防止堵塞。进一步用牙泥固定并缝合切口。手术后3天，所有大鼠均接受了抗生素（头孢地尼10 mg/kg，Ig）的预防性治疗。手术后4天进行实验。

　　疼痛阈值测试：使用制造商建议的垂直于大鼠眼眶周围区域的力值（15、10、8、6、4和2G），并使用von Frey线作为基线，获得压力阈值。当大鼠用其同侧前脚抚摸其面部时，记录了von Frey试验为阳性。头部迅速从兴奋剂中缩回或发出噪音。通过冯·弗雷（von Frey）测试评估面部异常疼痛，并计算为50％的阳性反应阈值。蔗糖偏爱测试：在研究之前（基线）和每周服用IS后进行蔗糖偏爱测试。在实验开始时，将动物暴露于蔗糖而不是水中48小时，以训练他们喝1％的蔗糖溶液。在禁食和禁水22小时后，对大鼠进行了一系列蔗糖适口性测试。每只动物同时使用两个饮水瓶。一种包含蔗糖溶液（1％），另一种包含水。 1小时后，称量这两个瓶子的重量，并计算出蔗糖消耗量的百分比。蔗糖偏爱（％）=蔗糖溶液消耗量/（蔗糖溶液消耗量+水消耗量）x 100。

　　OF测试：OF测试旨在分析老鼠的运动和举升行为。该设备包括一个圆形的黑色底座（直径90厘米），一个黑色的墙壁（50厘米），内部空间是一个直径为60厘米的圆形。外部空间是圆形的，宽度为30厘米。照明由40瓦的灯泡提供。在手术前一天的5分钟内和嗅球切除后的15天之内对所有大鼠进行测试。总距离，内部区域距离和内部区域时间由计算机的视频跟踪系统记录。实验者观察了将老鼠从录像中抬起的次数。对于每次测试，请用5％的酒精溶液擦拭以去除气味线索。内部面积时间的百分比（IT％）由内部面积时间/ 300S x 100计算得出。内部区域距离百分比（ID％）=内部区域距离/总距离x 100。

　　EPM测试：EPM测试的目的是通过距离地面70厘米的迷宫来测量类似焦虑的反应。两个闭合的臂有一个高22厘米的暗墙。两个张开臂的边缘的高度为0.5厘米。手臂之间的角度为90°。照明由40瓦的灯泡提供。将大鼠放在设备的中央，然后将其指向闭合的手臂5分钟。使用计算机视频跟踪系统分析了张开手臂所花费的时间百分比，它进入张开手臂的次数以及它进入张开手臂的总次数。张开双臂时间百分比（OT％）=张开双臂时间/ 300秒x 100。进入张开臂的次数的比率（OE％）计算为进入张开臂的次数/（进入张开臂的次数+进入闭合臂的次数） ×100。

　　标准抑郁和焦虑症量表：失去兴趣4分，慢动作4分，失重2分。最高的蔗糖偏爱得分是10分，最高的得分是10分（等同于锻炼和举重行为）。最大体重变化得分是5分。焦虑指数基于相同的原理（即，对新环境的恐惧），因此它的平均得分为7分。正常值的范围由CON组的结果确定，因为该组中的动物没有遭受疼痛并且受精神疾病影响的可能性较小。范围是 → 5％或 u003c 5％。 CON组的索引是正态分布的。高分表示正常行为，低分表示除体重外的抑郁或焦虑指数。超重和体重不足是对抑郁症的反应，因此将正常体重作为最高评分，而超重和体重不足的评分则较低。额叶前额叶的生化分析：在测试抑郁和焦虑后2天，处死大鼠。除去颅骨，解剖前额叶皮层并储存在-80℃下以进行生化分析。用酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒测量前额叶皮层中的5-羟色胺（5-HT）和多巴胺水平。 结果：面部回避阈值：面部回避阈值是在给药前1天和每日给药前测量的。在给药前的第一天，这四个组之间没有显着差异。给药后，IS和I + AMI组的阈值显着降低。给药后一周，IS组阈值保持在2g。但是，IS + AMI组的阈值在第8天逐渐增加，并且显着不同。在第一周的下半年和第21天，IS + AMI和AMI组之间存在显着差异。

　　抑郁测试：使用体重，蔗糖偏爱，运动距离和OF测试次数来评估抑郁。体重随时间增加，但四组之间无显着差异。反映喜乐的蔗糖偏爱是评估抑郁症的经典方法。在第21天，国际空间站组织对蔗糖的偏爱下降了。 21天后，IS组和CON组之间的差异具有统计学意义。运动和举升行为也可能反映出情绪低落。 Is组大鼠的步行距离明显短于CON组，搜索范围小于CON组。 AMI可显着改善IS组的运动和举升行为，但不能改善蔗糖偏爱性。

　　焦虑测试：要评估焦虑，请使用OF测试的ID％和IT％值以及EPM测试的OT％和OE％值。焦虑的老鼠害怕站着寻找更安全的地方，例如EPM的周围或闭合的手臂。 IS组的ID％和OE％显着低于CON组。 CON组和IS组之间未检测到IT％或OT％的差异。 AMI大大提高了ID％和IT％。和OE％。

　　抑郁和焦虑量表：抑郁会导致体重超标和体重不足。新分数的总分是5、体重330-360克（9-10周龄大鼠的正常体重）= 5、每增加10克，您就损失1点乘10克。体重 u003c 300克或 → 390克的得分是0分。在蔗糖偏爱测试中，高于95％的蔗糖得分为10分，低于50％的蔗糖得分为0分。每增加5％即可获得1点。在OF测试中，超过20m的运动行为为5分，没有运动为0分。每增加5m，就会增加1点。提升动作的总分也为5分，20次以上为5分，无搜索为0分，每增加5％则为1分。焦虑量表的总分为7分。超过30％的ID％，IT％或OT％得分为7分，而低于1％的得分为0分。每增加5％即可获得1点。 OO％的45％或更高为7分， u003c1％为0，而1-20％为1分。每增加5％即可获得1点。结果，大多数大鼠比CON组更沮丧和焦虑。然而，不是对照组中的所有大鼠都具有正常的情绪，IS组中的所有大鼠也不是沮丧或焦虑的。 AMI不仅对于抑郁症而且对于焦虑症都是有用的。

　　前额叶5-HT和多巴胺水平：是组前额叶5-HT和多巴胺水平持续下降。多次使用AMI不会增加5-HT的水平，但是当使用AMI治疗疼痛时，5-HT和多巴胺的水平会显着增加。结论：这项研究评估了慢性偏头痛动物模型中的抑郁和焦虑行为以及低剂量阿米替林的治疗效果。大多数慢性偏头痛大鼠表现出抑郁和焦虑样行为，但并非全部。我们希望使用新的抑郁和焦虑量表进行全面评估，并在以后的研究中发现抑郁和非抑郁的慢性偏头痛大鼠之间的差异。