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免疫学检测

    免疫学检测是根据抗原、抗体反应的原理,利用已知的抗原检测未知的抗体或利用已知的抗体检测未知的抗原,可以定性、定位和定量地检测某一特异蛋白。金开瑞可提供蛋白印迹(WB)、免疫组化(IHC)、免疫沉淀(IP)、免疫荧光(IF)、酶联免疫吸附(ELISA)、染色质免疫沉淀(ChIP)等。


Western blot(WB)——蛋白印迹


       WB技术利用抗体与组织或细胞样品中特定蛋白的特异性结合作用,根据显色条带的位置和强弱实现蛋白鉴定和表达分析。其具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,选用合适的内参抗体能够校正蛋白定量和上样过程中的误差,通过灰度计量可以定性或定量分析不同样品中蛋白表达情况。
 

Immunohistochemistry(IHC)——免疫组化 


       IHC技术利用特异性抗体与组织细胞原位抗原结合,通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原,对其进行定位、定性及定量的研究。其特点在于切片制作过程中保持组织、细胞的原有结构及形态,因此可以反应目标抗原在组织结构中的分布以及亚细胞定位。组织细胞定位往往是生理功能发挥或变化的体现,是研究中常常关注的因素。
 

Immunoprecipitation(IP)——免疫沉淀


       IP技术是利用抗原抗体特异性反应纯化富集样品中目的蛋白的一种方法。通常使目标蛋白同抗体-protein A/G形成免疫复合物沉淀而得以收集,然后通过western blot检测目的蛋白。
Co-IP技术是将样品中同抗体靶蛋白相互作用的蛋白一同随免疫复合物沉淀,检测两种目标蛋白质是否在体内存在相互作用,确定一种蛋白在体内的相互作用蛋白。
 

Immunofluorescence(IF)——免疫荧光


       IF技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术,将抗体分子与一些示踪标记结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位和定量。
 

Enzyme-Linked Immunosorbent Assay(ELISA)——酶联免疫吸附测定


        ELISA技术以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定样品中的抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。
 

Chromatin immunoprecipitation assay( ChIP)—— 染色质免疫沉淀


        ChIP技术是将样品中同抗体靶蛋白相互作用的DNA随免疫复合物沉淀,是研究体内蛋白质与DNA相互作用的有力工具,可以检测体内反式因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰以及转录因子与基因表达的关系。 


       (本文转载丁香通)

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