免疫印迹（常称之为Western印迹），可用于检测单克隆或多克隆抗体识别的抗原。

实验材料
       蛋白质
       试剂、试剂盒      

       转缓冲液               

仪器、耗材

 

 
      5.  准备转印膜，按凝胶大小但各边都比凝胶大约1 mm 剪膜。成45。地慢慢将凝胶放入蒸馏水中，水将会渗进膜中并润湿整个表面。然后在转移缓冲液中平衡10~15 min，PVDF膜短暂地在100%甲醇中放一下，然后在转移缓冲液中平衡10~15 min。
      6.  用转移缓冲液湿润凝胶表面，直接将已润湿的膜放在凝胶顶部，排去气泡。
      7.  润湿另一张Whatman 3MM 滤纸，并置于膜的阳极面，排去所有气泡，在滤纸的顶部放另一块Scotch-Brite垫或海绵。
      8.  将转移盒顶部的半面放置适当，扣紧，完成组装。
      9.  往转移槽中加入转移缓冲液，按正确的极性方向将转移盒放进电转仪中，连接电源。

      10.  在冷却条件下100 V 电转30~60 min，或在冷室中14 V 电转过夜，
      11.  关电源，拆卸转印装置，取出转印膜，并在膜上剪一小角或用软性铅笔或Paper-Mate笔作上标记定位。
      12.  凝胶用考马斯亮蓝染色以确定转移效率。需要时，也可将硝酸纤维素膜或PVDF膜以辅助方案提供的可逆染色方法使蛋白质显迹，也可用如考马斯亮蓝、印度墨墨汁、萘酚蓝或胶体金不可逆染色。
      13.  进行蛋白质的免疫杂交和显迹。

  （本文转载丁香园）