RNA提取(一)
1)取出-80℃保存样品,室温,溶解。
2)每1ml Trizol加0.2ml氯仿,强烈上下混匀,室温。静置2-3min,抽提RNA。
3)用超速低温离心机4℃,15000rpm,离心15min。
*离心结束后可分3层,最上层为透明水相,中间白色层为DNA和蛋白质层,最下层为有机溶剂相。
4)小心取水相RNA溶解层,移至新的1.5ml离心管中。
*小心避免吸取DNA和蛋白质层
5)每毫升Trizol加0.5ml 异丙醇,轻轻上下混匀数次,室温,静置10min,沉淀RNA。
6)4℃,15000rpm,离心10min。
*离心结束后可看到离心管壁贴壁形成的白色沉淀即为RNA。