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【动物实验外包服务】-A型肉毒素重链干预对大鼠脊髓损伤后生长相关蛋白表达的影响

  目的: 探讨人工重组A 型肉毒素重链对在体大鼠脊髓损伤局部生长相关蛋白表达的影响, 为阐明BoNT/ A 重链促神经突起再生机制提供依据。

  方法: 建立大鼠单侧腰段脊髓横断损伤模型并局部及鞘内给予BoNT/ A 重链;对用药后不同时间局部骨髓组织进行双向电泳检测总体蛋白表达;选择生长相关蛋白-43(GAP-43)和颈上神经节蛋白10(SCG 10)进行蛋白印迹和免疫荧光检测以观察二者在BoNT/ A 重链影响下的表达及分布。

  结果: (1)单侧腰髓离断损伤模型动物呈现明显单侧运动及感觉功能障碍;(2)脊髓损伤后给予BoNT/A 重链可影响损伤局部蛋白表达谱变化:BoNT/ A 重链可引起损伤局部蛋白点群在变化的基础上逆转或表达进一步增加,尤以MW 位于35 ~45 kDa 及18 ~25 kDa。等电点在5 ~7 范围的蛋白点表现明显;(3)蛋白印迹和免疫荧光染色结果提示: BoNT/ A 重链可促进p-GAP 43 和SCG 10 的表达(P< 0.05),且p-GAP 43 及SCG 10 主要以损伤周围细胞阳性明显,胞浆及突起皆呈阳性。

  结论: 脊髓损伤后给予BoNT/ A 重链可促进脊髓损伤后选择性生长相关蛋白p-GAP 43 和SCG 10 的表达。

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