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【动物实验外包服务】-小泛素样修饰物蛋白酶3调控小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞自噬

  目的 探讨小泛素样修饰物特异性蛋白酶3对小鼠肺组织细胞自噬的调控作用及分子机制。

  方法 应用免疫荧光技术检测SENP3在肺组织细胞中的定位;对SENP3基因野生型C57BL/6J小鼠(SENP3+/+)和SENP3基因敲除杂合子小鼠(SENP3+/-)进行饥饿处理,诱导细胞自噬; 应用免疫印迹法评估细胞自噬水平;应用电子显微镜观察和免疫荧光技术分析发生自噬的细胞类型;应用免疫共沉淀方法检测自噬相关分子卷曲螺旋状Myosin样Bcl-2相互作用蛋白1(coiledcoil myosin-like Bcl-2-interacting protein 1, BECN1)的SUMO化修饰。

  结果 SENP3在肺泡Ⅱ型上皮细胞中高表达。小鼠经饥饿处理后,肺泡Ⅱ型上皮细胞出现自噬现象,且SENP3+/-小鼠较SENP3+/+小鼠更明显。同时,肺组织样品中BECN1的SUMO2/3化修饰被SENP3去除。

  结论 SENP3抑制饥饿应激时小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的自噬,并可对细胞自噬程度进行精细调控。

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