目的:通过人工感染减蛋综合征病毒(egg drop syndrome virus,EDSV),观察病毒在不同品系小鼠体 内增殖情况以及动态变化规律,为EDSV构建载体提供理论依据与数据支持。
方法:选取免疫系统正常的BALB/c 小鼠、T细胞免疫缺陷裸鼠(Nu)以及高度免疫缺陷小鼠(NSG)为研究对象,每品系32只,雌性,5~ 6周龄,经腹腔 注射人工感染EDSV,分别于攻毒后1、3、5、7、14、21、28、35d采集血清,应用间接ELISA方法进行抗体监测;选择攻 毒后1、7、14、21、28d小鼠,采集心脏、肺、肝、脾、肾、小肠、子宫、气管、食管、脑10种组织,应用荧光定量PCR相对 定量比较Ct法(△△CT)进行各组织内病毒载量的检测。
结果:BALB/c小鼠于攻毒后3d即可在血清内检测到 抗体的表达,14d抗体水平达到最高,并一直维持至监测期内35d;Nu小鼠也可于攻毒后3d检测到抗体,表达水 平较BALB/c小鼠有所降低,攻毒14d后,Nu小鼠血清中抗体水平出现下降,至35d抗体一直维持在较低的水平; NSG小鼠在整个监测过程中,抗体水平一直处于阴性状态。 核酸相对定量结果显示,BALB/c小鼠感染后1d,肝组 织中的病毒表达量最高,达到5.45个数量级,其次由高到低依次是脾、食管、子宫、小肠、肺、气管、肾、心脏,脑组织 中病毒含量最低,随感染时间的延长,各组织内病毒表达量较感染1d均有所下降,至攻毒后28d,肝、脾病毒表达 量依然维持着较高的水平;Nu小鼠和NSG小鼠感染1d表现为脾中病毒表达量最高,分别为3.95和4.05个数量 级,其次为肝,攻毒28d,两种小鼠体内各器官内仍可以检出阳性信号,肝、脾病毒表达量较高。
结论:EDSV可刺 激小鼠产生免疫应答,在免疫缺陷小鼠体内抗体水平表达量较低。 该病毒在小鼠体内有肝、脾等组织嗜性,为 EDSV开发成为载体以及在实验动物模型上的进一步研究与应用提供了参考数据。