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【动物实验外包服务】-过氧化氢诱导大鼠离体子宫韧带成纤维细胞的相关变化

  目的 探讨氧化应激对子宫韧带成纤维细胞增殖、凋亡、胶原合成以及炎症因子表达的影响及可能机制。

  方法 将生长状况良好的第 3 代大鼠子宫韧带成纤维细胞分为低氧化应激组、高氧化应激组、对照组。 选 择 0. 2 mmol / L 和 0. 8 mmol / L 过氧化氢对子宫韧带成纤维细胞干预 4 h,建立细胞低水平和高水平的氧化应激模型,对照组未进行任何干预。 采用 MTT 法检测细胞增殖能力,Annexin V-FITC/ PI 法检测细胞凋亡情况,Western blot 法检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、炎症因子、信号通路相关蛋白的表达的蛋白水平。

  结果 与对照组和低氧化应激组相比,高氧化应激组细胞增殖能力下降(P < 0. 05),凋亡率上升(P < 0. 05),Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原合成明显减少 (P < 0. 05),白细胞介素 1β、肿瘤坏死因子 α 和白细胞介素 6 的蛋白表达水平增加(P < 0. 05);与对照组和低氧化应激组相比,高氧化应激组 p-ERK1 / 2、p-Akt 的表达明显降低(P < 0. 05),而总蛋白 ERK1 / 2、Akt 的表达基本保持不变。 低氧化应激组上述指标与对照组无显著差异。

  结论 氧化应激微环境中较高浓度的过氧化氢通过抑制 MAPK 通路中 ERK1 / 2 表达和 PI3K-Akt 通路中 Akt 表达,引起子宫韧带成纤维细胞的增殖、胶原合成能力下降,凋亡细胞和炎症因子表达增多,参与盆腔器官脱垂的发生发展。

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