XTT是一种与MTT类似的四唑氮衍生物,可被活细胞线粒体脱氢酶还原成水溶性的棕色甲肷产物,当XTT与电子偶合剂共同使用时,甲肷的生成量与细胞的增殖程度呈正相关。
实验方法:
首先配置6.6 mmol/L XTT溶液和220 mmol/L吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)溶液。临用时将XTT与PMS按1:1混合,形成XTT/PMS。接种XXX细胞:用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液,以每孔1000-10000个细胞接种到96孔板,每孔体积200 μL。培养细胞:同一般培养条件,培养3-5天(可根据试验目的和要求决定培养时间)。于终止培养前2 h,每孔加入XTT/PMS 20μL,混匀后再培养2 h。在酶标仪上450 nm处测定光吸光度,参考波长为655nm。