每个细胞的基因表达都有其特异性,单细胞,如干细胞、神经元细胞、发育的组织、激光捕获切片等样本中研究基因表达具有一定的困难性。Signosis开发了一种高敏感性的单细胞RT-PCR检测试剂,无需RNA制备,直接用细胞裂解产物进行分析。因此,少量细胞即可用于RT-PCR分析。细胞裂解、cDNA合成以及PCR扩增所需的组分均包含在该试剂盒中。
A.产品优势
一站式——试剂盒包含从细胞裂解、反转录到PCR实验所需的所有试剂;
无需RNA制备——细胞裂解产物可直接用于反转录;
功能强大——该试剂可获得全长的cDNA;
实时监控——整个分析过程可以实时监控。
B.技术原理
无需RNA制备,细胞裂解液裂解细胞后直接进行反转录,及随后的PCR分析。
C.原理示意图
D.结果展示
检测细胞裂解产物中有限的目标序列。逐渐增加细胞裂解的HeLa细胞数量。所有的样本用试剂盒中的RT-PCR试剂进行反转录。用ABI7700检测系统分析所有样本中β-actin、GAPDH和B2M三个基因的Real-time PCR结果,分别做三次重复。