目的:制备小鼠MHV,LCM,ECT和HANT液相芯片,建立转基因小鼠传染病抗体的xMAP多重检测方法。
方法:将荧光微球分别与小鼠MHV,LCM,ECT和HANT蛋白质偶联,以优化最佳蛋白质偶联量,检测抗体的最佳工作浓度和链霉亲和素-PE的最佳工作浓度。准备鼠标MHV。对LCM,ECT和HANT液相血清以及56种转基因小鼠血清样品,阴性血清,阳性血清和质量控制血清进行xMAP多重检测。它还使用传统的ELISA方法检查xMAP测试的结果。
结果:1)小鼠MHV,LCM,ECT和HANT蛋白的最佳偶联量分别为20μg,20μg,40μg和20μg,检测到的抗体的最佳浓度为2μg/ mL分别为2μg/ mL和2μg/ mL,分别为4μg/ mL;链霉亲和素-PE抗体的最佳浓度为2μg/ mL;(2)xMAP测试结果为No。 14、23、55和56个转基因小鼠的血清MHVMFI和指数值较高。对于质控血清,其余小鼠血清的MFI和指数值均比质控血清低,并且是转基因小鼠。 23号,55号和56号是MHV阳性。抗体和其余小鼠均具有MHV,LCM,ECT和HANT抗体。阴性;(3)ELISA检测结果显示MHVA450和No.14、No.23、No.55和No.56转基因的指标值,所有小鼠均高于质控血清,但其余所有小鼠血清A450和指标值低于质量控制血清。关于血清管理,转基因小鼠No.14、No.23、No.55和No.56对MHV抗体呈阳性,而其余小鼠对MHV,LCM,ECT和HANT抗体呈阴性。 ELISA测试的结果与xMAP测试的结果一致。结论结论:建立的xMAP多重检测技术可用于检测转基因小鼠的传染病。