1、96孔细胞培养 板中培养细胞,去培养液。用0.01mol/L PBS洗涤1次(如为悬浮细胞则用离心洗涤)。
2、去洗涤液后加入磷酸酶底物100μl/孔。
3、37℃,孵育1~4h。
4、加入0.1mol/L氢氧化钠10μl/孔。
5、在多孔酶标仪 上405nm处测光吸收度,将细胞培养板其中不含细胞,同样处理过的一孔作为空白对照,所测的每孔光吸收度可间接反应每孔中的细胞数。如在同样条件下作一细胞数的系列标准对照,以细胞数为X轴,光吸收度为Y轴,可作直线回归,可推算出每孔中的细胞。