10电泳:将载片移入电泳槽,调节电泳槽两端电压为20V,200mA,4摄氏度,电泳20min。
11中和:将载玻片移入新的裂解槽,注入中和液,浸没玻片,4摄氏度中和三次,每次5min.
12 梯度脱水:将载玻片移入新的裂解槽,进行梯度乙醇脱水(80%、100%),每个梯度脱水5min。
13 待载玻片室温干燥后,每片滴加PI(20ug/ml)20ul,再覆盖盖玻片,避光染色20min,注意盖片下不要产生气泡。
14 荧光显微镜下观察、采图,每份样品随机拍摄50个DNA受损细胞图像,还可用CASP彗星专用数据分析软件进行数据分析。