【课题实验整体外包】-谷氨酰胺联合脐血间充质干细胞移植在大鼠肠缺血再灌注损伤中的作用
发布人:biologicalnj
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发布时间:2021-07-15
目的:探讨谷氨酰胺联合脐血间充质干细胞(MSC)移植对大鼠肠缺血再灌注损伤的作用。
方法:移植前体外复苏培养脐带血间充质干细胞,CM-DiI荧光标记后观察脐带血间充质干细胞的位置。 80只SD大鼠随机分为正常对照组、缺血再灌注损伤组、谷氨酰胺组、MSC移植组和每组15只大鼠的联合组。对照组接受生理盐水灌肠,受伤组接受TNB(S乙醇稀释)灌肠。 TNBS造模后1小时,谷氨酰胺组尾静脉接受0.45g/kg谷氨酰胺,MSC移植组接受1倍灌肠。尾静脉。1010/L脐血间充质干细胞悬液,联合组接受0.45 g/kg尾静脉谷氨酰胺+脐血间充质干细胞悬液1×1010/L.. ELISA检测各组大鼠血清中小肠脂肪酸结合蛋白(IFABP)、白细胞介素6(IL-6)和超氧化物歧化酶(SOD)水平;检测再灌注后1、3小时的含水量: 谷氨酰胺联合 MSC 移植后大鼠肠黏膜上皮细胞中 caspase-3、NF-kB 和 Bcl-2 mRNA 和蛋白质的T 表达 - 通过 PCR 和蛋白质印迹观察。
结果:荧光追踪观察到移植的MSC细胞分布在肠黏膜淋巴组织和腺上皮细胞之间,MSC可能参与了肠道缺血再灌注损伤的修复过程,表明存在性。各组大鼠血清SOD、IFABP、IL-6水平变化比较。伤组血清IFABP、IL-6水平明显高于对照组,但谷氨酰胺组比较MSC移植组及联合组与伤组及对照组伤者血清中与对照组相比,SOD含量显着降低,但谷氨酰胺组、MSC移植组和联合组的SOD含量明显高于联合组。组合组的增幅更大。显然(P0.05)。与对照组相比,损伤肠黏膜上皮细胞中Caspase-3和NF-kB mRNA和蛋白表达显着上调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达显着下调(Pu003c0。05),但两组均与组合组相比。区别很重要(Pu003c0.05)。
结论:谷氨酰胺组和MSCs移植后,大鼠肠道缺血再灌注损伤程度明显减轻。通过抑制和促进caspase-3和NF-kB的表达,减少肠黏膜缺血再灌注。