3.SUMO质粒瞬时转染

      （1） 将生长状态良好的细胞接种于直径4-6cm的培养皿中，5% CO2，37℃培养箱内培养16-24h，细胞融合至60%-90%时可进行转染。

      （2） 转染前1h将细胞培养液换成不含抗生素的培养液。

      （3） 用Opti-EME培养液稀释4倍的Lipo2000试剂。

      （4） 用Opti-EME培养液稀释SUMO质粒。

      （5） 将上两步溶液按1:1比例混合配成转染复合液，室温，孵育20min。

      （6） 将已接种细胞的培养皿中加入200ul转染复合液，充分混匀。

      （7） 继续培养4-6h，更换正常培养液。

      （8） 培养24-72h，镜下观察和检测带有荧光标记的SUMO质粒的表达。